黄病毒有70多种,其中许多引起人类和动物疾病,包括登革热,寨卡病毒和黄热病病毒。Mariana Sequetin Cunha和合作伙伴Adolfo Lutz研究所的合作者已经在巴西验证了一种既快速又灵敏的新型黄病毒鉴定测试,该实验室是向圣保罗州政府报告的领先流行病学监测实验室。
有关该主题的文章已在病毒学档案中发表。
该研究由圣保罗研究基金会(FAPESP)通过一个主题项目提供支持,该项目的主要研究人员(PI)是MaurícioLacerda Nogueira,而常规研究补助金则是Paulo Cesar Maiorka。
Sequetin告诉我们:“我们着手通过一种可靠的方法来改善对巴西黄病毒的监测。为此,我们使用了RT-qPCR分析技术。”RT-qPCR代表逆转录定量聚合酶链反应。实验室技术利用聚合酶链反应将RNA逆转录成DNA并扩增特定DNA靶标。它被认为是快速鉴定病毒的黄金标准,并且被世界卫生组织推荐用于诊断SARS-CoV-2感染。
塞奎汀说:“直到最近,巴西鉴定黄病毒的主要方法还是需要用从人类患者或动物身上提取的可疑物质接种新生小鼠的大脑。”“当我于2012年加入阿道夫·鲁兹研究所(Adolfo Lutz Institute)担任研究员时,我决定建立一种替代方法,该方法不需要老鼠,但可以将患者的血液,血清或内脏样品直接提交RT-qPCR。”
关键问题是RT-qPCR是否足够灵敏以检测所分析样品中的少量病毒。塞奎汀回忆说,阿道夫·卢茨研究所保留了大量的深度冷冻小鼠,这些小鼠是在1990年代接种的,并储存在-80°C下。她说:“我从他们的大脑中提取了遗传物质,并寻求通过制备越来越稀的溶液来检测不同黄病毒的阈值。”
已证明所建立的协议是高度敏感和特定的。它可用于检测在巴西发生的不同黄病毒,并用于前哨动物和载体中的病毒监测。