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淀粉酶的测定结果受方法的影响较大,不同方法参考值亦有所不同,临床所用方法也较多,因此必须了解所用测定方法和其参考值,才能作出正确的诊断。
原理:
把病人的标本(含淀粉酶)和底物的多糖一起进行反应,测定反应后的剩余底物或生成的产物来计算淀粉酶的活性。
底物一般含有4~7葡萄糖(戊糖、庚糖等),并连有发色基团如β-2-氯-4-硝基酚-G7等。经葡萄糖苷酶催化水解为黄色的对硝基酚和葡萄糖。
对硝基苯酚的生成量在一定范围内与AMY活性成正比,在405nm可以进行连续监测即可测出AMY的活性。
注意事项
(1)很多阴离子有激活淀粉酶的作用,其中以Cl-,Br-为最强。
(2)血清甘油三酯浓度高时,可以抑制淀粉酶活性,应将标本加以稀释,以降低其影响。
(3)肝素抗凝由于Ca2+是淀粉酶分子组成的部分,一般抗凝剂如草酸盐,枸橼酸盐等因能与Ca2+结合,抑制淀粉酶活性而不宜应用。
(4)淀粉酶的测定方法操作要简单、快速,适于急诊应用,因为急性胰腺炎需要尽快诊断和治疗。